重樓(Rhizoma Paridis),又稱七葉一支花,是百合科重樓屬植物的泛稱,以蚤休之名首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。重樓屬植物全世界共有24種,我國(guó)種類最多,擁有19種,其中西南各省區(qū)種類和資源極為豐富[1]。常見的品種有華重樓、滇重樓和七葉一支花。藥用的有華重樓、云南重樓、七葉一支花、狹葉重樓、長(zhǎng)藥隔重樓、海南重樓、凌云重樓、南重樓[2]?!?/FONT>中國(guó)藥典》2005年版收載的為云南重樓Paris polyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.一Mazz.和七葉一枝花P.D phylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara的干燥根莖。本品味苦,性微寒,有小毒,歸肝經(jīng),具有清熱解毒、消腫止痛、涼肝定驚之功效,用于癰瘡、咽喉腫痛、毒蛇咬傷、跌打傷痛、涼風(fēng)抽搐等癥[3]。近年來(lái),隨著研究的深入,重樓的藥用價(jià)值被日益重視。
1 生藥鑒定
1.1 混淆品 重樓屬植物極多,除藥典收載上述兩種作為全國(guó)使用的正品外,還有不少種在各地習(xí)用,有的屬于衍化變種,它們不同之處在于葉形的變化,其次是花瓣與花萼的長(zhǎng)短不同,還在于根部的變化,有的根莖粗壯,有的為纖細(xì)須根,藥材主要不同在于它們有效成分及含量存在差異[4]。
1.2 偽品 拳參與重樓外形相近,有人用之冒替重樓出售??砂匆韵路椒ê?jiǎn)單鑒別:
1.2.1 外觀 最易鑒別的特點(diǎn):重樓質(zhì)堅(jiān)實(shí),斷面色白,有粉性;拳參質(zhì)相對(duì)疏松,斷面近腎形,淺棕紅色至棕紅色[5]。
1.2.2 顯微鑒別 重樓粉末白色,淀粉粒甚多,呈類圓形、長(zhǎng)橢圓形或腎形,直徑3~18μm;草酸鈣結(jié)晶成束或散在,長(zhǎng)80~250μm,梯紋及同紋導(dǎo)管直徑10~25μm。拳參粉末淡棕紅色,草酸鈣結(jié)晶甚多,直徑15~65μm;具緣紋導(dǎo)管直徑20~55μm,亦有網(wǎng)紋及螺紋導(dǎo)管;淀粉粒呈橢圓形、卵形或類圓形,直徑5~12μm[6]。
1.2.3 理化反應(yīng) 重樓含皂甙,其皂甙元為薯蕷皂甙元,取本品細(xì)粉0.5g,加水3ml,浸漬10min后劇烈振搖發(fā)生持久性泡沫。拳參含鞣質(zhì),取本品一薄片(或粉末少量),加乙醇2滴與1%三氯化鐵乙醇溶液l滴,顯藍(lán)黑色[6]。
1.2.4 薄層色譜 重樓的供試品與重樓對(duì)照品藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯示相同藍(lán)色的斑點(diǎn);拳參無(wú)[7]。
1.2.5 紫外光譜 重樓在(241±2)nm,(273±2)nm有最大吸收,而拳參無(wú)最大吸收[7]。
2 化學(xué)成分研究
重樓的主要有效成分是甾體皂苷,并含有氨基酸、甾酮、蛻皮激素、黃酮苷等化合物。
2.1 甾體類
2.1.1 甾體皂苷 薯蕷皂苷有3-李糖阿拉伯糖基葡萄糖苷為重樓皂苷(parissaponin)、重樓皂苷Ⅰ(diosgenin3-O-a-L-rha-(1-2)-[a-L-arab-(1-4)]-D-glu)、重樓皂苷Ⅱ(diosgenin3-O-a-rha(1-4)-a-L-rha-(1-4)-[a-L-rha-(1-2)]-D-glu)、薯蕷皂苷及C-羥基-原薯蕷皂苷、C-甲氧基-原薯蕷皂苷、C-羥基-原重樓皂苷I、C-甲氧基-原重樓皂苷Ⅰ、C-甲氧基-原重樓皂苷Ⅱ等。偏諾皂苷含有偏諾皂苷元的有5個(gè)皂苷[8]。紐替皂苷有25S-異紐替皂苷元-3-O-α-L-鼠李毗喃糖(1→2)-[α-L-鼠李吡喃糖(1→4)]-β-D-葡萄吡喃糖苷、26-β-D-葡萄吡喃糖-紐替皂苷元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖(1→2)-[α-L-鼠李吡喃糖(1→4)]-β-D-葡萄吡喃糖苷[9]。
2.1.2 植物蛻皮激素 在云南重樓中可分離檢測(cè)到β-蛻皮激素(β-ecdysone)[8]。
2.1.3 植物甾醇 谷甾醇、豆甾醇及其衍生的苷類[8]。
2.2 黃酮 其主要為山柰酚-3- O-β-D-葡萄吡喃糖基(1→6)-β-D-葡萄吡喃苷和7-O-a-L-鼠李吡喃糖基-山柰酚-3-O-β-D-葡萄吡喃糖基(1→6)-β-D-葡萄糖苷[10]。
2.3 其他成分 氨基酸、微量元素、鞣質(zhì)、肌苷酸等。
3 藥理研究
3.1 抗腫瘤作用 重樓皂苷單體Ⅰ和Ⅵ,對(duì)白血病P388、L1210和鼻咽癌KB細(xì)胞的ED分別為0.94、0.14、0.16μg/ml和0.22、0.43、0.029μg/ml[11]。石小楓等[12]研究重樓總皂苷體外對(duì)3H-TdR、3H-UR摻人H22瘤細(xì)胞的影響,結(jié)果5、10μg/ml重樓總皂苷對(duì)H22動(dòng)物移植性腫瘤細(xì)胞DNA、RNA的生物合成有較強(qiáng)的抑制作用。體外實(shí)驗(yàn)中,重樓皂苷對(duì)艾氏腹水癌(EAC)、宮頸癌U、RS小鼠肉瘤S、肝癌腹水型Hep、小鼠癌H22等細(xì)胞株有明顯抑制作用,其主要機(jī)理為抑制DNA合成。重樓的水、甲醇和乙醇提取物對(duì)A-549
(人肺癌)、MCF-7(人乳腺癌)、HT-29(人結(jié)腸腺癌)、A-496(人腎腺癌)、PACA-2(人胰腺癌)、P-3(人前列腺癌)6種腫瘤細(xì)胞均有明顯的抑制作用[13]。
3.2 止血作用 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明[14],小鼠灌胃七葉一枝花,均呈較強(qiáng)的止血作用。偏諾皂苷C(偏諾皂苷元的三糖苷)在濃度很低時(shí)體內(nèi)試驗(yàn)即呈現(xiàn)較強(qiáng)的止血作用。止血過(guò)程是一個(gè)神經(jīng)、神經(jīng)體液因素,血管收縮、血小板凝集及凝血過(guò)程等參與的復(fù)雜過(guò)程。七葉一枝花類生藥及有關(guān)化合物究竟作用于止血過(guò)程的哪個(gè)環(huán)節(jié),尚需深入探討。
3.3 止咳、平喘作用 重樓煎劑15g/kg灌胃,對(duì)二氧化硫引咳的小鼠有止咳作用;煎劑或乙醇提取物均按15g/kg灌胃,對(duì)組織胺噴霧所致氣管痙攣的豚鼠有保護(hù)作用,乙醇提取物作用尤強(qiáng)[15]。
3.4 抗菌、抗病毒、消炎作用 對(duì)七葉一枝花常用的6個(gè)種和變種進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示各藥對(duì)宋內(nèi)氏痢疾桿菌、粘質(zhì)沙雷氏桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌(敏感和耐藥)均有一定的抑制作用,對(duì)綠膿桿菌有擴(kuò)散色素作用;對(duì)其它菌作用不明顯。體外試驗(yàn)表明七葉一枝花有很強(qiáng)的抗白色念珠菌作用,MIC為1.5mg/ml,效價(jià)為6.25mg/ml[16]。重樓皂甙有殺滅血吸蟲尾蚴和阻止尾蚴進(jìn)入皮膚的防護(hù)作用[17]。
3.5 鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛作用 雌性小鼠電刺激測(cè)痛試驗(yàn)結(jié)果表明,重樓可提高痛閾。重樓有顯著鎮(zhèn)靜作用,其強(qiáng)度不弱于安定[18]。重樓皂甙在嗎啡急性耐受形成后可能有增強(qiáng)嗎啡的鎮(zhèn)痛作用,并可能通過(guò)影響腦內(nèi)ACTH和β-EP等因素影響耐受的形成[19]。
3.6 免疫調(diào)節(jié)作用 重樓皂苷Ⅰ~Ⅲ在小鼠成纖維細(xì)胞L-929培養(yǎng)基中可引起ConA誘導(dǎo)小鼠淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng),并能促進(jìn)小鼠粒/巨噬細(xì)胞克隆形成細(xì)胞(GM-CFC)增殖。重樓皂苷Ⅱ?qū)HA誘導(dǎo)的人外周全血細(xì)胞有促有絲分裂作用,體內(nèi)試驗(yàn)?zāi)茉鰪?qiáng)C3H/HeN小鼠的自然殺傷細(xì)胞活性,誘導(dǎo)干擾素產(chǎn)生,并可抑制S-抗原誘導(dǎo)的豚鼠自身免疫性眼色素層炎(EAU)的發(fā)生和發(fā)展[20]。
3.7 心血管作用 薯蕷皂苷在標(biāo)準(zhǔn)和低鈣培養(yǎng)基中可使心肌細(xì)胞搏動(dòng)數(shù)增加,且能顯著增加心肌細(xì)胞鈣離子攝人,偏諾皂苷影響較小。重樓水提物可部分拮抗內(nèi)皮素(ET)引起的小鼠猝死作用,并對(duì)ET引起的離體大鼠主動(dòng)脈環(huán)收縮有內(nèi)皮依賴的舒張作用[20]。
3.8 其他作用 抑制精子活性作用[21]、細(xì)胞毒作用[20]。
3.9 毒性作用 主要毒性成分為皂苷和酚類。小鼠灌服煎劑30~60g/kg,3天內(nèi)未見死亡。小鼠靜脈注射0.2%的藥液0.4ml/只,無(wú)死亡。大鼠亞急性毒性試驗(yàn),總皂甙用量為265mg/kg時(shí),肝細(xì)胞有壞死現(xiàn)象[22]。
4 臨床應(yīng)用
4.1 各種血癥、痛癥 重樓為中藥止血要藥,云南白藥多年來(lái)用于內(nèi)外婦傷科各種血癥、痛癥。宮血寧膠囊[23]用于婦科各型子宮出血癥,療效顯著。以三七血傷寧膠囊[24]有良好的止血作用。
4.2 癌癥 重樓常被組成方劑用于癌癥的治療,如食管癌、喉癌、直腸癌、肺癌、宮頸癌等[25]。如蓮花片可用于治療原發(fā)性腫瘤。
4.3 炎癥 喉舒[26]有較強(qiáng)的抗菌消炎作用。將重樓末用米醋調(diào)勻外涂疼痛部位,可治療流行性腮腺炎[23]。重樓解毒湯[27]可治療慢性盆腔炎。
4.4 皰疹 以重樓為主要成分的獨(dú)角蓮藥膏外用治療帶狀皰疹有較好療效;山寶皮寧對(duì)單狀皰疹的感染有良好的臨床療效[28]。
4.5 女性衣原體感染 以蚤休粉陰道給藥可治療女性生殖器衣原體感染[29]。
4.6 淋巴結(jié)結(jié)核潰瘍 采用異煙肼,維生素B6口服,外敷蚤休,淋巴結(jié)縮小,分泌膿液停止,結(jié)果治療組總有效率為93.3%,臨床療效顯著優(yōu)于對(duì)照組[30]。
4.7 其他 還可以治療疔瘡癰腫、毒蛇咬傷,跌打傷痛、毛蟲皮炎、隱翅蟲皮炎、蜂蟄、枕部多發(fā)性癤腫等。
5 組織培養(yǎng)和快速繁殖
重樓是一種稀缺的中藥植物,近幾年由于野生資源受到無(wú)節(jié)制的采挖,已近枯竭,價(jià)格在不斷地攀升。重樓資源急需通過(guò)野生變?nèi)斯ぴ耘鄟?lái)保護(hù)和利用。近些年很多學(xué)者也對(duì)重樓的組織培養(yǎng)和快速繁殖進(jìn)行了大量研究。重樓的繁殖方式有:
5.1 根莖切塊繁殖 冬季在重樓倒苗后,取重樓根莖。以節(jié)為基礎(chǔ)切割,切口在相鄰兩節(jié)間的中部。傷口用草木灰或生石灰處理,沾滿切口為度[31]。
5.2 種子繁殖 種子繁殖技術(shù)要求較高,生長(zhǎng)周期長(zhǎng),但繁殖系數(shù)大,可提供大量種苗。需要培育成2年生的地中莖,才可做種苗,在大田栽培[31]。
5.3 組織培養(yǎng) 目前為止,對(duì)于重樓的組織培養(yǎng)的研究還未取得令人滿意的結(jié)果。在對(duì)重樓組織培養(yǎng)的研究中發(fā)現(xiàn),僅有莖尖作外植體能誘導(dǎo)出愈傷組織,而且生長(zhǎng)緩慢,不含原植物中的皂甙,采用莖、葉、花蕾作外植體都不能得到愈傷組織。對(duì)離
體培養(yǎng)的條件還有待進(jìn)行廣泛的研究:外植體種類,考慮使用上、下胚軸,子葉等幼嫩的材料;選擇液體培養(yǎng)方式;在變溫的條件下進(jìn)行培養(yǎng);選擇有效培養(yǎng)基配方等[32]。
6 結(jié)語(yǔ)
重樓的化學(xué)成分復(fù)雜,藥理活性強(qiáng),臨床應(yīng)用廣,有必要進(jìn)一步加強(qiáng)化學(xué)成分的分離鑒定和對(duì)已知成分的藥效藥理研究。對(duì)于人工栽培,根莖切塊繁殖和種子繁殖技術(shù)相對(duì)成熟,組織培養(yǎng)技術(shù)還有待進(jìn)一步研究。
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