摘 要
目的：比較肝炎靈和苦參素及苦參堿的體外對(duì)2.2.15細(xì)胞的細(xì)胞毒性和細(xì)胞培養(yǎng)上清液HBsAg、HBeAg和HBVDNA表達(dá)的抑制作用。
方法：以拉米呋啶作為西藥對(duì)照組，采用四氮唑還原法(MTT)檢測(cè)藥物對(duì)2.2.15細(xì)胞生長(zhǎng)的毒性/抑制作用并測(cè)定TC50, 采用ELISA法檢測(cè)藥物作用后細(xì)胞培養(yǎng)上清液中HBsAg、HBeAg含量并測(cè)定相應(yīng)的IC50即EC50，采用PCR擴(kuò)增和動(dòng)態(tài)檢測(cè)法檢測(cè)上清液中HBV DNA含量并測(cè)定相應(yīng)的IC50即EC50，根據(jù)TC50和EC50求得相應(yīng)的抑制作用的選擇指數(shù)SI即治療指數(shù)TI。
結(jié)果：肝炎靈量效抑制2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)上清液HBsAg、HBeAg和HBVDNA表達(dá)。細(xì)胞毒性TC50上，拉米呋啶<苦參堿<苦參素；抑制2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)上清液HBsAg和HBeAg表達(dá)EC50上，苦參素＞=苦參堿<拉米呋啶；抑制2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)上清液HBV DNA表達(dá)EC50上，拉米呋啶<<苦參素<苦參堿。有趣的是高劑量苦參堿和苦參素及肝炎靈致細(xì)胞毒性時(shí)，苦參堿和苦參素均致2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)上清液HBsAg、HBeAg和HBV DNA的表達(dá)上調(diào)。而肝炎靈致2.2.15細(xì)胞毒性同時(shí)仍明顯下調(diào)2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)上清液HBsAg、HBeAg和HBV DNA的表達(dá)。
討論：肝炎靈量效抑制2.2.15細(xì)胞的HBV體外復(fù)制，但體外一定濃度范圍內(nèi)的苦參堿和苦參素對(duì)2.2.15細(xì)胞的HBV體外復(fù)制有良好的抑制作用,而且表現(xiàn)為對(duì)病毒基因翻譯(蛋白抗原表達(dá))的抑制作用優(yōu)于對(duì)病毒基因復(fù)制 (DNA)的抑制作用，但過高濃度的苦參堿和苦參素可能因致細(xì)胞完整性破壞(壞死)而致病毒顆粒大量溢出進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)上清液，高濃度的肝炎靈雖致細(xì)胞毒性(凋亡)而細(xì)胞培養(yǎng)上清液病毒顆粒亦下調(diào)，原因可能是肝炎靈或仍然明顯抑制HBV復(fù)制和基因產(chǎn)物表達(dá)；或因致細(xì)胞凋亡而病毒顆粒因凋亡細(xì)胞的胞膜完整性不能分泌進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)上清液。
結(jié)論：肝炎靈抗病毒效應(yīng)與其說與其苦參類生物堿組分中的苦參堿和苦參素抗病毒作用有關(guān)，不如說更與其中其他苦參類生物堿組分甚至非苦參類生物堿組分如黃酮類等組分的抗病毒作用有關(guān)。
關(guān)鍵詞：肝炎靈 苦參素 苦參堿 拉米呋啶 2.2.15細(xì)胞 乙型肝炎病毒 HBsAg HBeAg HBV DNA 體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 比較研究
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