管花肉蓯蓉的苯乙醇苷類(lèi)成分
中草藥 2000年第11期第31卷 有效成分
作者：宋志宏　屠鵬飛　趙玉英　鄭俊華
單位：北京醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院天然藥物學(xué)系　100083
關(guān)鍵詞：列當(dāng)科；肉蓯蓉屬；管花肉蓯蓉；苯乙醇苷
　　摘　要　采用各種色譜技術(shù)主要為HPLC從國(guó)產(chǎn)管花肉 蓯蓉Cistanche tubulosa (Schenk) Wight 中分離得到7 個(gè)苯乙醇苷 類(lèi)化合物，根據(jù)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)鑒定它們的結(jié)構(gòu)為2′-乙酰基類(lèi)葉升麻苷(Ⅰ)、類(lèi)葉 升麻苷(Ⅱ)、crenatoside(Ⅲ)、丁香苷A 3′-α-L-吡喃鼠李糖苷(Ⅳ )、異類(lèi)葉升麻苷(Ⅴ)、去咖啡酰基類(lèi)葉升麻苷(Ⅵ)和紅景天苷(Ⅶ)。化合物Ⅲ為首次從本 屬植物中分離得到，其它化合物為首次從本植物中分離得到。
Phenylethanoid Glycosides from Cistanche tubulosa
　　Song Zhihong, Tu Pengfei, Zhao Yuyi ng and Zheng Junhua
　?。―epartment of Natural Medicines, School of Pharmaceutical Sciences, Beijing Univ ersity of Medical Sciences 　Beijing 100083）
　　Abstract　　Seven compounds were isolated from the 95% ethanol extract of Cistanche tubulosa (Schrenk) Wight by various chromat ography including preparative HPLC. They were identified as 2′-acetylacteosid e (Ⅰ), acteoside (Ⅱ), crenatoside (Ⅲ), syringalide A 3′-α-L-rhamnopyranoside (Ⅳ), isoacteoside (Ⅴ), decaffeoylacteoside (Ⅵ) and rhodi oloside (Ⅶ) on the basis of chemical evidences and spectral data. Among these compounds, Ⅲ was isolated from plants of Cistanche Hoffing. et Link for the first time, and the others were isolated from the plant of C. tubulosa for the first time.
　　Key words　　Orobanchaceae　Cistanche　 Hoffing. et Link　Cistanche tubulosa (Schrenk) Wight　ph enylethanoid glycosides
　　中藥肉蓯蓉為列當(dāng)科肉蓯蓉屬植物的干燥帶鱗葉的肉質(zhì)莖，是常用中藥之一，具有補(bǔ)腎陽(yáng)、 益精血、潤(rùn)腸通便等功效，常用于治療男子陽(yáng)痿、女子不孕、腰膝冷痛、血枯便秘等癥 ［1］。我國(guó)有肉蓯蓉屬植物4 種1 變種，中國(guó)藥典一九九五年版收載的品種為肉蓯蓉 Cistanche deserticola Y. C. Ma.， 由于藥源緊缺，本屬其它種也 在各地使用。管花肉蓯蓉C. tubulosa (Schrenk) Wight 主產(chǎn)于我國(guó)新疆，資源比較豐富，為目前中花肉蓯蓉的主要基源植物。在巴基 斯坦、印度等國(guó)也有一種管花肉蓯蓉C. tubulosa (Schrenk) Hook. f. 作為藥材使用，但它與國(guó)產(chǎn)管藥肉蓯蓉在形態(tài)、化學(xué)成分及寄主植物上都有較大區(qū)別，被認(rèn) 為 是不同的種。日本學(xué)者對(duì)巴基斯坦產(chǎn)的管花肉蓯蓉進(jìn)行了深入研究，分離得 到了苯乙醇苷、環(huán)烯醚萜苷、木脂素苷等成分。國(guó)內(nèi)學(xué)者對(duì)國(guó)產(chǎn)管花肉蓯蓉 進(jìn)行了初步的化學(xué)成分研究，并對(duì)其揮發(fā)油成分進(jìn)行了GC-MS分析。為了闡 明國(guó)產(chǎn)管花肉蓯蓉的化學(xué)成分，為中藥肉蓯蓉新藥源的開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)，我們對(duì)其化 學(xué)成分進(jìn)行了研究，采用HPLC法，從95%乙醇提取物的正丁醇萃取部分分離得到了7 個(gè)苯乙 醇苷類(lèi)化合物，根據(jù)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)鑒定它們的結(jié)構(gòu)為2′-乙?；?lèi)葉升麻苷(acetyl acteoside，Ⅰ)、類(lèi)葉升麻苷(acteoside，Ⅱ)、crenatoside (Ⅲ)、丁香苷A 3′-α-[ WTBX L-吡喃鼠李糖苷(syringalide A 3′-α-L-rhamno pyranoside，Ⅳ)、異類(lèi)葉升麻苷(isoacteoside，Ⅴ)、去咖啡?；?lèi)葉升麻苷(decaffeo ylacteoside，Ⅵ) 和紅景天苷(rhodioloside，Ⅶ)(圖1)。Ⅲ為首次從本屬植物中分離得 到，其它化合物為首次從本植物中分離得到。
 圖1　化合物Ⅰ～Ⅶ的化學(xué)結(jié)構(gòu)式
　　1　儀器和試劑
　　紅外光譜儀：Perkin-Elmer 983型，KBr壓片。核磁共振波譜儀：Bruker ARX-400型、Var ian UNITY-500型，TMS或溶媒作內(nèi)標(biāo)。質(zhì)譜儀：KYKY-ZHP-5^#型，ZabSpecE型。高效液 相色譜儀：Waters 600型(600 泵，486 紫外/可見(jiàn)檢測(cè)器)；Gilson 712型制備型(306 泵， 118 紫外/可見(jiàn)檢測(cè)器)。HPLC色譜柱：a. Phenomenex Kromasil 5μm C₁₈ 10×250 mm；b. Alltech Econosil C₁₈ 10 μm 22 mm×250 mm；c. Phenomenex Pro digy 5 μm ODS (3) 100 ? 4.6 mm×250 mm。
　　色譜純甲醇、乙腈，水為去離子水重蒸后過(guò)濾使用。薄層層析硅膠為青島海洋化工廠產(chǎn)品； 反相硅膠(RP-18，100～120 目)為北京歐亞新技術(shù)公司產(chǎn)品；Sephadex LH-20為Pharmaci a產(chǎn)品；D₁₀₁大孔吸附樹(shù)脂為天津南開(kāi)大學(xué)化工廠產(chǎn)品；Diaion HP20 大孔吸附樹(shù)脂 為日本三菱化工產(chǎn)品；高效薄層板、RP-18F₂₅₄薄層板均為Merck產(chǎn)品；聚酰胺薄膜 為浙江四青生化材料廠產(chǎn)品。
　　管花肉蓯蓉Cistanche tubulosa (Schenk) R. Wight 的干燥肉質(zhì)莖購(gòu)于 新疆于田縣醫(yī)藥公司，經(jīng)本文作者屠鵬飛教授鑒定，樣品保存于本室。
　　2　提取和分離
　　管花肉蓯蓉生藥36.0 kg，粉碎后用95%EtOH回流提取4 次，合并濾液減壓濃縮后得乙醇浸 膏，再以適量的H₂O混懸，依次用P.ether.、EtOAc和n-BuOH萃取。 取n-BuOH萃取物(500 g)進(jìn)行d101大孔吸附樹(shù)脂柱層析，H₂O、1 0%，30%，50%，70%EtOH依次洗脫。
　　50%EtOH部分(10.0 g)經(jīng)反相硅膠柱層析(30%→85%MeOH梯度洗脫)、Sephadex LH-20柱層 析(40%→70%MeOH梯度洗脫)得12 個(gè)流份(Fr.1～12)，其中Fr.8～9(0.36 g)經(jīng)HPLC分離( c18柱b，H2O-MeOH-CH₃CN=62∶29∶9，8.0 mL/min，330 nm)得化合物Ⅰ (21 mg)、Ⅱ(39 mg)、Ⅲ(13 mg)和Ⅳ(28 mg)；Fr.10(0.38 g)經(jīng)HPLC分離(C₁₈柱b，45 %MeOH，8.0 mL/min，330 nm)得化合物Ⅴ(170 mg)。
　　H2O部分(140.0 g)經(jīng)Diaion HP20 大孔吸附樹(shù)脂柱層析(h2O→MeOH梯度洗脫)得7 個(gè)流 份(Fr.Ⅰ～Ⅶ)。Fr.Ⅳ(3.2 g)經(jīng)Sephadex LH-20柱層析(h2O→30%MeOH梯度洗脫、反 相硅膠柱層析〔H2O→50%MeOH(含0.25%HCOOH)梯度洗脫〕得9 個(gè)流份，其中流份5 和6( 0.13 g)經(jīng)HPLC分離(C10柱a，H2O-MeOH-HCOOH=85∶15∶0.5，2.5 mL/min，2 80 nm)得化合物Ⅵ(17 mg)和Ⅶ(12 mg)。
　　3　結(jié)構(gòu)鑒定
　　化合物Ⅰ：淡黃色粉末，UV₃₆₅下顯藍(lán)色熒光，F(xiàn)eCl₃-K₃［Fe(CN)₆］顯藍(lán)色 。IR，¹HNMR，F(xiàn)ABMS數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的2′-乙酰基類(lèi)葉升麻苷基本一致 ，因此確定Ⅰ為2′-乙酰基類(lèi)葉升麻苷。
　　化合物Ⅱ：淡黃色粉末，UV₃₆₅下顯藍(lán)色熒光，F(xiàn)eCl₃-K₃［Fe(CN)₆］顯藍(lán)色 。IR，¹HNMR，F(xiàn)ABMS數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的類(lèi)葉升麻苷基本一致，因此確定 Ⅱ?yàn)轭?lèi)葉升麻苷。
　　化合物Ⅲ：淡黃色粉末，UV₃₆₅下顯藍(lán)色熒光，F(xiàn)eCl₃-K₃［Fe(CN)₆］顯藍(lán)色 。IR(KBr)cm^-1：3 394(羥基)，2 928，1 694和1 630(α，β-不 飽和酯)，1 600和1 515(苯環(huán))。¹HNMR(500 MHz，CD₃OD)δ：1.16(3H， d，6.5，R-CH₃)，4.03(1H，dd，12.0，3.0，A-H-α)，4.18(1H，t，9.5，G- H-3)，4.59(1H，d，8.0，G-H-1)，4.64(1H，dd，10.5，3.0，A-H-β)，5.14( 1H，t，9.5，G-H-4)，5.21(1H，d，1.5，R-H-1)，6.32(1H，d，16.0，E-H-α )，6.73(1H，dd，8.0，2.0，A-H-6)，6.77(1H，d，8.0，A-H-5)，6.82(1H，d ，8.0，E-H-5)，6.87(1H，d，2.0，A-H-2)，7.00(1H，dd，8.0，2.0，E-H-6 )，7.10(1H，d，2.0，E-H-2)，7.65(1H，d，16.0，E-H-β)。¹³CNMR 數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。FABMS(posit.)m/z：663(M+H)⁺，477(M+H-Rha)⁺，325(M+H-Rha-Aglycon e)⁺。分子式為C₂₉H₃₄O₁₅。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)^［10］報(bào)道的cren atoside基本一致。這是首次從本屬植物中得到苷元β位OH與Glc 2 位OH形成醚鍵的苯乙醇 苷類(lèi)化合物。
　　化合物Ⅳ：淡黃色粉末，UV₃₆₅下顯藍(lán)色熒光，F(xiàn)eCl₃-K₃［Fe(CN)₆］顯藍(lán)色 。IR(KBr)cm^-1：3 434(羥基)，2 939，1 692和1 628(α，β-不 飽和酯)，1 609和1 519(苯環(huán))。¹HNMR(500 MHz，CD₃OD)δ：1.13(3H， d，6.5，R-CH₃)，2.89(2H，m，A-H-β)，3.75(1H，m，A-H-α)，4.10(1H，m ，A-H-α)，4.42(1H，d，8.0，G-H-1)，4.96(1H，t，9.0，G-H-4)，5.23(1H ，d，1.5，R-H-1)，6.32(1H，d，16.0，E-H-α)，6.74(2H，d，8.5，A-H-3， 5)，6.82(1H，d，8.0，E-H-5)，7.00(1H，dd，8.0，2.0，E-H-6)，7.09(1H，d ，2.0，E-H-2)，7.11(2H，d，8.5，A-H-2，6)，7.63(1H，d，16.0，E-H-β) 。¹³CNMR數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。FABMS(posit.)m/z：631(M+Na)⁺，609(M+H)⁺，471(M +H-Aglycone)⁺，463(M+H-Rha)⁺，325(M+H-Aglycone-Rha)⁺。分子式為C₂₉H 36O₁₄。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)^［6］報(bào)道的丁香苷A 3′-α-L-吡喃鼠李糖苷基本一致。
表1　化合物Ⅰ～Ⅶ的¹³CNMR光譜數(shù)據(jù)

C	Ⅰa	Ⅱb	Ⅲa	Ⅳ a	Ⅴa	Ⅵb	Ⅶb
Aglycone(A)
1	131.0	129.1	129.1	130.0	130.6	129.1	128 .5
2	116.5	116.2	113.8	130.3	116.4	116.3	129.7
3	145.3	144.9	145.7	115.4	145.4	145.0	115.0
4	143.9	143.4	145.7	156.1	144.0	143.5	155.6
5	115.5	115.4	115.5	115.4	115.8	115.4	115.0
6	120.6	119.4	118.2	130.3	120.6	119.5	129.7
α(8)	71.2	70.1	77.8	71.6	71.7	70.5	70.1
β(7)	35.7	34.9	72.3	35.7	36.0	35.0	34.8
Ester(E)
1	126.8	125.5	126.9	126.9	127.0
2	114.5	114.7	114.6	114.5	114.3
3	146.2	145.5	146.2	146.2	146.1
4	149.2	148.3	149.2	149.1	149.0
5	115.8	115.7	115.8	115.8	115.6
6	122.6	121.3	122.6	122.5	122.5
α(8)	113.8	113.6	113.8	114.0	114.1
β(7)	147.5	145.4	147.6	147.3	146.6
CO	167.3	165.6	167.3	167.6	168.4
Glc(G)
1	101.1	102.2	98.4	103.5	103.7	102.4	102.8
2	74.5	74.4	81.3	75.5	75.1	74.1	73.4
3	79.9	79.0	76.7	81.0	83.2	81.5	76.9
4	70.1	69.0	69.7	69.9	69.7	68.5	69.9
5	75.4	74.4	77.2	75.4	74.7	76.7	76.8
6	61.5	60.6	61.4	61.7	63.9	6.10	61.1
OAc
CH3	20.2
CO	170.8
Rha(R)
1	102.7	101.1	101.5	102.4	102.0	100.6
2	71.9	70.4	71.4	71.7	71.8	70.6
3	71.2	70.2	71.3	71.4	71.6	70.0
4	72.9	71.6	72.9	73.1	73.3	72.0
5	69.9	68.6	69.5	69.8	69.4	68.1
6	17.9	18.1	17.7	17.8	17.2	17.8

　　a. in CD₃OD　b. in DMSO-d₆　　化合物Ⅴ：灰白色粉末，UV₃₆₅下顯藍(lán)色熒光，F(xiàn)eCl₃-K₃［Fe(CN)₆］顯藍(lán)色 。IR，¹HNMR，F(xiàn)ABMS數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)^［5］報(bào)道的異類(lèi)葉升麻苷基本一致。
　　化合物Ⅵ：白色粉末。IR，¹HNMR，F(xiàn)ABMS數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的去咖啡?；?類(lèi)葉升麻苷基本一致。
　　化合物Ⅶ：白色粉末。IR(KBr)cm^-1：3 374(羥基)，2 918，1 608和 1 512(苯環(huán))。¹HNMR(400 MHz，DMSO-d₆)δ：2.73(2H，m，A-H-β)，3.56 (1H，m，A-H-α)，3.87(1H，m，A-H-α)，4.16(1H，d，7.8，G-H-1)，6.66(2H ，d，8.4，A-H-3，5)，7.04(2H，d，8.4，A-H-2，6)。¹³CNMR數(shù)據(jù)見(jiàn)表 1。FABMS(posit.)m/z：339(M+K)⁺，323(M+Na)⁺，301(M+H)⁺。分子式為C₁₄H ₂₀O₇。分析以上數(shù)據(jù)，Ⅶ符合文獻(xiàn)^［12］報(bào)道的紅景天苷。
　　致謝：防化研究院分析化學(xué)研究室及北京大學(xué)分析中心代測(cè)核磁共振譜，軍事醫(yī)學(xué) 科學(xué)院分析中心代測(cè)質(zhì)譜，本校藥學(xué)院教學(xué)中心代測(cè)紅外光譜?！ddress： Song Zhihong, College of Pharmacy, Beijing University of Medi cal Sciences, Beijing