Colormetry；Eluate;TLC遠(yuǎn)志為遠(yuǎn)志科植物遠(yuǎn)志PolygalatenuifoliaWilld?；蚵讶~遠(yuǎn)志PolygalasibiricaL。的干燥根［1］。本品始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，味苦、辛、性微溫，歸心、腎、肺經(jīng)，具有安神益智、祛痰開竅、消腫散癰之功效。其化學(xué)成分主要有遠(yuǎn)志皂苷（Onjisaponin）A、B、C、D、E、F和G7種齊墩果酸型三萜皂苷類；遠(yuǎn)志酮（Onjixanthone）Ⅰ和Ⅱ，1羥基3，6，7三甲基噸酮等噸酮類；哈爾滿、1丁氧羰基β咔啉等生物堿類；糖及糖苷類和脂肪油類等［2］。中醫(yī)炮制理論認(rèn)為蜜炙遠(yuǎn)志能增強(qiáng)其化痰止咳的作用，歷來就有“蜜炙甘緩而潤肺”之說［3］。現(xiàn)代研究證實(shí)遠(yuǎn)志的化痰止咳作用的主要活性成分是遠(yuǎn)志皂苷［2］。近年來關(guān)于生遠(yuǎn)志化學(xué)成分研究的報(bào)道很多，但有關(guān)于遠(yuǎn)志蜜制前后總皂苷類成分含量的比較未見相關(guān)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用香草醛－高氯酸比色法測定遠(yuǎn)志蜜炙前后總皂苷類成分的含量［4］，初步研究蜜炙對遠(yuǎn)志中的總皂苷類成分的含量的影響，同時(shí)，測定并比較蜜遠(yuǎn)志和生遠(yuǎn)志的浸出物，旨在為蜜炙遠(yuǎn)志提供科學(xué)依據(jù)。探求蜜遠(yuǎn)志和生遠(yuǎn)志之間的相關(guān)性，為蜜炙遠(yuǎn)志的“解毒”作用提供物質(zhì)基礎(chǔ)研究［5］。

1器材

8500MC分光光度計(jì)（無錫科達(dá)儀器廠）；電子天平（德國塞多利斯）。遠(yuǎn)志購自成都市場，經(jīng)本校盧先明老師鑒定為遠(yuǎn)志PolygalatenuifoliaWilld。的干燥根；蜜遠(yuǎn)志按《中國藥典》2005版Ⅰ部炮制通則項(xiàng)下進(jìn)行炮制（每100kg遠(yuǎn)志用蜜量20kg）。遠(yuǎn)志皂苷元對照品：中國藥品生物制品檢定所提供（批號(hào)為111572200301）。所用試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2。1對照品溶液的制備精密稱取遠(yuǎn)志皂苷元對照品適量，加甲醇制成每毫升含0。2mg。

2。1。1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密移取對照品溶液0。1，0。2，0。3，0。4，0。5ml于5支15ml具塞試管中，水浴揮盡溶劑，依次加入5%香草醛溶液0。4ml，高氯酸1。6ml，室溫放置10min后于60℃水浴加熱15min，取出立即冰水冷卻2min，加乙酸10ml，搖勻，以相應(yīng)試劑作空白，照紫外可見分光光度法［1］于560nm處測吸光度。以遠(yuǎn)志皂苷元的量為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，得回歸方程為A＝3。4865X－0。0112（A為吸光度，X為遠(yuǎn)志皂苷元量），r＝0。9995（n＝5），線性范圍為0。0244~0。122mg。

2。1。2穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)精密移取對照品溶液、供試品溶液于15ml具塞試管中，依法顯色后每間隔10min測定1次。結(jié)果表明吸光度在1h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2。1。3精密度實(shí)驗(yàn)對同一蜜遠(yuǎn)志供試品溶液依法平行測定5次，RSD為1。7%。

2。1。4重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)對同一批次蜜遠(yuǎn)志依法平行測定5次，RSD為3。9%。

2。1。5回收率實(shí)驗(yàn)取已知含量的蜜遠(yuǎn)志，加入對照品適量，依法測定，計(jì)算回收率。平均回收率為98。92%，RSD為3。8%（n＝5）。

2。2樣品總皂苷含量對同一批生遠(yuǎn)志及相應(yīng)5批炮制的蜜遠(yuǎn)志依法進(jìn)行總皂苷的含量測定，結(jié)果見表1（注：以下數(shù)據(jù)均以干燥品計(jì)）。5批蜜遠(yuǎn)志的總皂苷含量平均為2。207％，RSD＝2。72（n＝5）。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)可知蜜遠(yuǎn)志的總皂苷含量比生遠(yuǎn)志的總皂苷含量高。若將蜜遠(yuǎn)志中的蜜量按1/6扣除后，總皂苷含量平均為2。648％。

表1生遠(yuǎn)志、蜜遠(yuǎn)志總皂苷含量（略）

2。3浸出物的比較

2。3。1方法分別取生遠(yuǎn)志和蜜遠(yuǎn)志粗粉4g，精密稱定。置錐形瓶中加石油醚（30~60℃）40ml，加熱回流1h。濾過。藥渣用適量石油醚洗滌，棄去石油醚液，藥渣揮干。置錐形瓶中，精密加入70％乙醇100ml，密塞。稱定重量。靜置1h后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰并保持微沸1h，放冷后取下錐形瓶，再稱定重量，用70％乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液25ml置干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干后于105℃干燥3h置干燥器中冷卻30min，迅速精密稱定重量。以干燥品計(jì)算醇溶性浸出物的含量，并比較。

2。3。2結(jié)果見表2。

表2生遠(yuǎn)志、蜜遠(yuǎn)志醇溶性浸出物含量（略）

蜜遠(yuǎn)志的浸出物含量平均為50。50％，RSD＝3。7％（n＝5）。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)可知蜜遠(yuǎn)的浸出物含量明顯比生遠(yuǎn)志的浸出物含量高。若將蜜遠(yuǎn)志中的蜜量按1/6扣除后，浸出物含量平均為60。6％。

2。4TLC比較取生遠(yuǎn)志粉末1g，加石油醚（30~60℃）20ml回流提取1h，濾過，藥渣和濾紙揮盡石油醚后，加95％乙醇20ml回流提取1h，趁熱過濾，濾液水浴蒸干，殘?jiān)盟?0ml溶解，依次用水飽和醋酸乙酯提取2次（20，20ml），水層再用水飽和正丁醇提取2次（20，20ml），合并正丁醇層，水浴蒸干，殘?jiān)?ml甲醇使溶解，作為生遠(yuǎn)志供試品溶液。另取蜜遠(yuǎn)志粉末1g，同法制成蜜遠(yuǎn)志供試品溶液。再取遠(yuǎn)志皂苷元對照品，加甲醇制成每毫升含0。5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（附錄ⅥB）試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各4～6μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板（厚500μm）上，以三氯甲烷甲醇水（65∶35∶10）10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸無水乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清楚，分別置日光和紫外光燈（365nm）下檢視。結(jié)果見圖1~2。

1，2。生遠(yuǎn)志供試品3。遠(yuǎn)志皂苷元對照品4，5。蜜遠(yuǎn)志供試品圖1紫外光色譜（略）

圖2顯色后可見光色譜（略）

結(jié)論：由圖1、2可知生遠(yuǎn)志供試品顯色前熒光色譜、顯色后可見光色譜與蜜遠(yuǎn)志色譜基本相符；由圖2可知生遠(yuǎn)志供試品和蜜遠(yuǎn)志供試品對應(yīng)的幾個(gè)斑點(diǎn)均呈紫羅蘭色；圖1檢視到遠(yuǎn)志皂苷元對照品的斑點(diǎn)，圖2中遠(yuǎn)志皂苷元對照品斑點(diǎn)呈紫羅蘭色，而在相應(yīng)位置生遠(yuǎn)志供試品和蜜遠(yuǎn)志供試品均未檢視到相應(yīng)斑點(diǎn)。以上可以說明遠(yuǎn)志蜜炙后其TLC圖譜并未發(fā)生改變，即說明蜜炙前后遠(yuǎn)志中的成分可能并未改變。

3討論

3。1以遠(yuǎn)志皂苷元為對照品來測定和計(jì)算生遠(yuǎn)志和蜜遠(yuǎn)志中總皂苷的含量，所得的結(jié)果是以遠(yuǎn)志皂苷元計(jì)算的相對含量，測定結(jié)果可作為評價(jià)遠(yuǎn)志蜜炙前后所含遠(yuǎn)志總皂苷含量變化的主要依據(jù)之一。

3。2本實(shí)驗(yàn)曾采用遠(yuǎn)志直接用甲醇提取的方法制備供試品溶液測定其遠(yuǎn)志總皂苷的含量，結(jié)果：生遠(yuǎn)志的總皂苷含量平均為4。223％，蜜遠(yuǎn)志的總皂苷含量平均為4。426％，RSD＝4。22（n＝5），結(jié)果說明蜜遠(yuǎn)志中總皂苷含量高于生遠(yuǎn)志。

3。3傳統(tǒng)炮制理論認(rèn)為蜜炙遠(yuǎn)志能增強(qiáng)其化痰止咳的作用，現(xiàn)代研究證實(shí)遠(yuǎn)志的化痰止咳作用的主要活性成分是遠(yuǎn)志皂苷，本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了遠(yuǎn)志蜜炙后所含遠(yuǎn)志總皂苷有所增加，同時(shí)實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了遠(yuǎn)志蜜炙后其70%乙醇浸出物含量增加，因此，臨床主張使用炮制品是有其科學(xué)依據(jù)的。